生化培养箱测定肉制品菌群的实验步骤

发布日期：2025年04月29日作者：生元仪器点击：次

实验准备

培养基配制：

准备不同类型的培养基，如伊红美兰琼脂培养基、营养琼脂培养基、乳糖胆盐液体培养基等。

按照配方准确称量培养基成分，溶解于蒸馏水中。

将配制好的培养基分装到适当的容器中，如试管、培养皿等。

灭菌：

使用高压蒸汽灭菌器对培养基进行高压蒸汽灭菌，通常在121°C、15 psi（约1.05 kg/cm²）的条件下灭菌15至20分钟。

对实验器材，如培养皿、移液管、试管等，进行干热灭菌，通常在160°C至180°C的条件下灭菌2小时。

采样与培养

采样：

从肉制品中取适量样本，通常为25克。

将样本加入到含有225毫升已灭菌的乳糖胆盐液体培养基的试管中。

培养：

将接种后的试管放入生化培养箱中，设置适当的温度（通常为36°C±1°C）。

培养时间通常为18至24小时。

观察产气情况与稀释

观察产气：

培养结束后，观察试管中的产气情况，记录阳性管数。

系列稀释：

对样本进行系列稀释，以便于后续的微生物分离。常用的稀释液包括生理盐水、磷酸盐缓冲液等。

划线与涂布

平板划线法：

使用无菌接种环，在已灭菌的琼脂培养基表面划线，通过划线来稀释和分离微生物。

涂布平板法：

将系列稀释后的样本涂布在琼脂培养基表面，使用无菌涂布器均匀涂布。

鉴定

菌落观察：

观察培养基上的菌落特征，如大小、形状、颜色、光泽等。

革兰氏染色与镜检：

对疑似菌落进行革兰氏染色，并在显微镜下观察其形态和染色特性，以鉴定是否为特定菌种（如大肠菌群）。

菌种保藏

将分离纯化后的菌种转移到适当的保藏介质中，如琼脂斜面、甘油管等，并存放在低温（如-80°C）冰箱中，以备后续使用。

这些步骤为一般的肉制品菌群测定流程，具体操作时可能需要根据实验目的、所使用的培养基和仪器设备等因素进行调整